YY∕T 1585-2017 總25-羥基維生素D測(cè)定試劑盒（標(biāo)記免疫分析法）

國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布
2017-12-05 發(fā)布，2018-12-01實(shí)施

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1—2009給出的規(guī)則起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。

本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局提出。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)醫(yī)用臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室和體外診斷系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC 136)歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：北京市醫(yī)療器械檢驗(yàn)所、西門子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品(上海)有限公司、雅培貿(mào)易(上海)有限公司、北京科美生物技術(shù)有限公司。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：鄒迎曙、汪少穎、王雪峰、強(qiáng)中華。

1 范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了人總25-羥基維生素D測(cè)定試劑盒(標(biāo)記免疫分析法)的分類、要求、試驗(yàn)方法、標(biāo)識(shí)、標(biāo)簽和使用說(shuō)明書、包裝、運(yùn)輸和貯存。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于定量測(cè)定人總25-羥基維生素D的試劑盒。包括以酶標(biāo)記、(電)化學(xué)發(fā)光標(biāo)記等標(biāo)記方法為捕獲抗體，以微孔板、管、磁顆粒、微珠和塑料珠等載體為包被抗體，用于體外定量檢測(cè)人血清或血漿中總25-羥基維生素D含量的免疫分析試劑盒。

本標(biāo)準(zhǔn)不適用于：

a) 用膠體金或其他方法標(biāo)記的定性或半定量測(cè)定人總25-羥基維生素D的試劑(如：試紙條、生物芯片等)；

b) 擬用于單獨(dú)銷售的總25-羥基維生素D校準(zhǔn)品和總25-羥基維生素D質(zhì)控品。

2 規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T 191 包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志

GB/T 21415 體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測(cè)量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性

GB/T 29791.2 體外診斷醫(yī)療器械 制造商提供的信息(標(biāo)示) 第2部分：專業(yè)用體外診斷試劑

3 分類

總25-羥基維生素D試劑盒按照標(biāo)記方法不同可以分為酶標(biāo)記總25-羥基維生素D試劑盒、(電)化學(xué)發(fā)光標(biāo)記總25-羥基維生素D試劑盒、(時(shí)間分辨)熒光標(biāo)記總25-羥基維生素D試劑盒等；根據(jù)固相載體不同可以分為微孔板式、管式、磁顆粒、微球珠和塑料珠等為載體的總25-羥基維生素D試劑盒；根據(jù)操作過(guò)程的不同可分為手工操作法和儀器自動(dòng)操作法總25-羥基維生素D試劑盒。

4 要求

4.1 外觀

試劑盒各組分應(yīng)齊全、完整，液體無(wú)滲漏。

4.2 溯源性

生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)根據(jù)GB/T 21415及有關(guān)規(guī)定提供所用校準(zhǔn)品的來(lái)源、賦值過(guò)程以及不確定度等內(nèi)容。

4.3 準(zhǔn)確度

可選用以下方法之一進(jìn)行驗(yàn)證(如適用，優(yōu)先采用相對(duì)偏差的方法)：

a) 相對(duì)偏差：使用可用于評(píng)價(jià)常規(guī)方法的有證參考物質(zhì)(CRM)進(jìn)行測(cè)定，實(shí)測(cè)值與標(biāo)示值的相對(duì)偏差應(yīng)在±15%范圍內(nèi)；
b) 回收試驗(yàn)：回收率應(yīng)在[85%，115%]范圍內(nèi)。

4.4 檢出限

檢出限應(yīng)≤8.1ng/mL。

4.5 線性

線性范圍應(yīng)覆蓋[8.1，70.0]ng/mL，在制造商所規(guī)定的線性范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r應(yīng)≥0.99。

4.6 重復(fù)性

利用同一批試劑盒對(duì)濃度在[8，20]ng/mL和[30，50]ng/mL的樣本各重復(fù)檢測(cè)10次，其變異系數(shù)應(yīng)不大于10%。

4.7 批間差

用3個(gè)批號(hào)試劑盒檢測(cè)同一份樣本，則3個(gè)批號(hào)試劑盒之間的批間變異系數(shù)CV≤15%。

4.8 穩(wěn)定性

可對(duì)效期穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性進(jìn)行驗(yàn)證。

a) 效期穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)規(guī)定試劑盒的有效期。取效期末的試劑盒檢測(cè)其試劑準(zhǔn)確度、檢出限、線性和重復(fù)性，應(yīng)符合4.3～4.6的要求；

b) 熱穩(wěn)定性試驗(yàn)：取有效期內(nèi)的試劑盒根據(jù)生產(chǎn)企業(yè)所聲稱的熱穩(wěn)定性條件，檢測(cè)其試劑準(zhǔn)確度、檢出限、線性和重復(fù)性，應(yīng)符合4.3～4.6的要求。

注1：熱穩(wěn)定性試驗(yàn)不能用于推導(dǎo)產(chǎn)品有效期，除非是采用基于大量的穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)建立的推導(dǎo)公式。

注2：一般地，效期為1年時(shí)選擇不超過(guò)1個(gè)月的產(chǎn)品，效期為半年時(shí)選擇不超過(guò)半個(gè)月的產(chǎn)品，以此類推。但如超過(guò)規(guī)定時(shí)間，產(chǎn)品符合要求時(shí)也可以接受。

注3：根據(jù)產(chǎn)品特性可選擇4.8a)、4.8b)方法的任意組合，但所選用方法宜能驗(yàn)證產(chǎn)品的穩(wěn)定性，以保證在效期內(nèi)產(chǎn)品性能符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

5 試驗(yàn)方法

5.1 外觀

在自然光下以正常視力或矯正視力目視檢查，應(yīng)符合4.1的要求。

5.2 溯源性

生產(chǎn)企業(yè)提供的溯源性資料應(yīng)符合4.2的要求。

5.3 準(zhǔn)確度

5.3.1 總則

建議按如下優(yōu)先順序，采用下列方法之一測(cè)試試劑盒的準(zhǔn)確度，應(yīng)符合4.3的要求。

5.3.2 相對(duì)偏差

試劑盒測(cè)試可用于評(píng)價(jià)常規(guī)方法的有證參考物質(zhì)(CRM)3次，測(cè)試結(jié)果記為(Xi)，按式(1)分別計(jì)算相對(duì)偏差(Bi)，如果3次結(jié)果都符合4.3a)的要求，即判為合格。如果大于等于2次的結(jié)果不符合，即判為不合格。如果有1次結(jié)果不符合要求，則應(yīng)重新連續(xù)測(cè)試20次，并分別按照式(1)計(jì)算相對(duì)偏差，如果大于或等于19次測(cè)試的結(jié)果符合4.3a)的要求，即判為合格，準(zhǔn)確度符合4.3a)的要求。

式中：
B_i——相對(duì)偏差；
X_i——測(cè)量濃度；
T ——標(biāo)定濃度。

5.3.3 回收試驗(yàn)

將已知濃度的高水平待測(cè)物(A)加入到低濃度的血清(或其他體液成分)B中，所加待測(cè)物A與血清(或其他體液成分)B之間的體積比例為不大于1：9，各重復(fù)檢測(cè)3次，取平均值，根據(jù)式(2)計(jì)算出回收率，結(jié)果應(yīng)符合4.3b)的要求。

式中：
R ——回收率；
C ——向B液中加入A液后的檢測(cè)濃度的平均值；
V₀——B液體積；
V₃——A液體積；
C₀——B液濃度的平均值；
C₃——A液濃度。

5.4 檢出限

制造商應(yīng)提供總25-羥基維生素D試劑盒的空白限、檢出限及參考區(qū)間等相關(guān)信息。根據(jù)制造商提供的信息，對(duì)5份濃度近似檢出限的低值樣本進(jìn)行檢測(cè)，每份樣本檢測(cè)5次，對(duì)檢測(cè)結(jié)果按大小進(jìn)行排序，符合如下條件，即可認(rèn)為制造商提供的空白限和檢出限的設(shè)置基本合理，結(jié)果應(yīng)符合4.4的要求。

a) 低于制造商提供的空白限數(shù)值的檢測(cè)結(jié)果的數(shù)量應(yīng)小于或等于3個(gè)；

b) 無(wú)高于制造商提供的參考區(qū)間下限的檢測(cè)結(jié)果的數(shù)值。

5.5 線性

用接近分析范圍上限的高濃度樣本，以一定比例稀釋至分析范圍下限附近，至少為5個(gè)濃度(X_i)樣本，分別用總25-羥基維生素D試劑盒測(cè)試，每個(gè)濃度至少重復(fù)測(cè)試3次，計(jì)算平均值，將結(jié)果平均值和稀釋比例用最小二乘法進(jìn)行線性擬合，并計(jì)算線性相關(guān)系數(shù)r，結(jié)果應(yīng)符合4.5的要求。

5.6 重復(fù)性

利用同一批試劑盒對(duì)濃度在[8，20]ng/mL和[30，50]ng/mL的樣本各重復(fù)檢測(cè)10次，計(jì)算10次測(cè)量濃度結(jié)果的平均值M和標(biāo)準(zhǔn)差SD，根據(jù)式(3)得出變異系數(shù)CV，結(jié)果應(yīng)符合4.6的要求。

式中：
CV——變異系數(shù)；
SD——10次測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差；
M ——10次測(cè)量結(jié)果的平均值。

5.7 批間差

用3個(gè)批號(hào)的試劑盒分別檢測(cè)同一份濃度為[30，50]ng/mL樣本，各重復(fù)10次，計(jì)算30次測(cè)量濃度值結(jié)果的平均值M和標(biāo)準(zhǔn)差SD，根據(jù)式(4)得出變異系數(shù)CV，結(jié)果應(yīng)符合4.7的要求。

式中：
CV——變異系數(shù)；
SD——30次測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差；
M ——30次測(cè)量結(jié)果的平均值。

5.8 穩(wěn)定性

5.8.1 效期穩(wěn)定性

取失效期的試劑盒按照4.3～4.6方法進(jìn)行檢測(cè)，應(yīng)符合4.8a)的要求；

5.8.2 熱穩(wěn)定性試驗(yàn)

取有效期內(nèi)試劑盒根據(jù)生產(chǎn)企業(yè)所聲稱的熱穩(wěn)定性條件，按照4.3～4.6方法進(jìn)行檢測(cè)，應(yīng)符合4.8b)的要求。

6 標(biāo)識(shí)、標(biāo)簽和使用說(shuō)明書

應(yīng)符合GB/T 29791.2的相關(guān)規(guī)定。

7 包裝、運(yùn)輸和貯存

7.1 包裝

包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志應(yīng)符合GB/T 191的規(guī)定。包裝容器應(yīng)保證密封性良好，完整，無(wú)泄漏，無(wú)破損。

7.2 運(yùn)輸

試劑盒應(yīng)按生產(chǎn)企業(yè)的要求運(yùn)輸。在運(yùn)輸過(guò)程中，應(yīng)防潮，應(yīng)防止重物堆壓，避免陽(yáng)光直射和雨雪浸淋，防止與酸堿物質(zhì)接觸，防止內(nèi)外包裝破損。

7.3 貯存

試劑盒應(yīng)在生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定條件下保存。

參考文獻(xiàn)

[1] GB/T 3358.1—2009 統(tǒng)計(jì)學(xué)詞匯及符號(hào) 第1部分：一般統(tǒng)計(jì)術(shù)語(yǔ)與用于概率的術(shù)語(yǔ).
[2] GB/T 29791.1 體外診斷醫(yī)療器械 制造商提供的信息(標(biāo)示) 第1部分：術(shù)語(yǔ)、定義和通用要求(ISO 18113-1).
[3] YY/T 0316—2016 醫(yī)療器械 風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用.
[4] YY 0466.1—2016 醫(yī)療器械 用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和提供信息的符號(hào) 第1部分：通用要求.
[5] CLSI EP6-A,Evaluation of the Linearity of Quantitative measurement Procedures:A Sta-tistical Approach; Approved Guideline.
[6] CLSI EP17-A,Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantita-tion;Approved Guideline.